三种甘蔗叶片蛋白质分离纯化方法比较及双向电泳体系优化

摘要：

为了优化适用于甘蔗叶片蛋白质的分离纯化方法与双向凝胶电泳体系,比较了3种蛋白质分离纯化方法对甘蔗叶片蛋白质的SDS-PAGE电泳图谱、蛋白质提取率以及双向凝胶电泳的影响,同时优化了双向电泳条件.结果显示,SDS提取法的SDS-PAGE电泳图谱中条带较少,蛋白质沉淀杂质多,效果差;三氯乙酸/丙酮沉淀法蛋白质沉淀得率高,但沉淀复溶性差,蛋白质溶液浓度低,难于满足双向电泳大胶的高上样量要求;酚抽提法蛋白质沉淀得率虽低,但沉淀纯度高、复溶性好,蛋白质溶液浓度高,是适合双向电泳分离纯化甘蔗叶片蛋白质的理想方法.酚抽提法蛋白质双向凝胶电泳合适的胶条pH范围为4～7,17 cm大胶合适的上样量为800μg,平均可分离出954个蛋白点.

关键词：甘蔗叶片、蛋白质纯化、SDS-PAGE、双向凝胶电泳、条件优化

所属期刊栏目：39

分类号：S566.1;Q51(经济作物)

资助基金：广西自然科学基金项目2010GXNSFA013101,2011GXNSFF018002;广西农科院团队项目桂农科2011YT01

在线出版日期：2017-04-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5