伪狂犬病病毒TaqMan双重实时荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用
为建立快速、特异、灵敏的鉴别伪狂犬病病毒(PRV)野毒株和疫苗株的方法,本试验基于PRV gB和gE基因保守区域序列,设计了 2对特异性的引物和探针,探针标记不同发光基团,以区分野毒株和疫苗株.通过对引物的筛选和反应条件的优化,建立了可鉴别PRV野毒株和疫苗株的TaqMan双重实时荧光定量PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏性、重复性和干扰性等进行评估.结果显示,该方法能同时特异性地检测出PRV野毒株和疫苗株,而与PPV、PCV2、PRRSV、CFSV、JEV等无交叉反应;该方法灵敏性高,对PRV gE和gB基因最低检测量分别为27.1 copies/μL和2.74 copies/μL;该方法重复性好,变异系数小于1％;用该方法对18份临床样本进行PRV gB和gE基因检测,且与普通PCR方法相比,符合率高达100％.结果表明,本试验建立的TaqMan双重实时荧光定量PCR方法可用于临床样本中PRV野毒株和疫苗株的鉴别检测,为猪伪狂犬病防制和净化提供了一种有效的技术手段.
伪狂犬病病毒、gE基因、gB基因、实时荧光定量PCR
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S853.65(动物医学（兽医学）)
河南省科技攻关;河南牧业经济学院博士启动资金;河南牧业经济学院科研创新基金项目
2022-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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