禽腺病毒-Ⅰ群、新城疫病毒和传染性支气管炎病毒多重PCR检测方法的建立
为快速检测禽腺病毒-Ⅰ群(FAV-Ⅰ)感染,且能有效区分常见混合感染的新城疫病毒(NDV)和传染性支气管炎病毒(IBV),本研究建立了多重PCR诊断方法.根据GenBank发表的FAV-Ⅰ的Hexon基因、NDV的F基因和IBV的N基因分别设计了3对特异性引物,通过对引物浓度、退火温度等反应条件的优化建立多重PCR诊断方法,并对该方法进行了特异性和敏感性研究,且对临床样本进行检测.结果 发现,本研究建立的多重PCR方法可准确扩增出大小为895 bp(FAV-Ⅰ)、1 600 bp(IBV)和529 bp(NDV)的特异性片段;3种引物最佳浓度分别为3 pmol/μL、3 pmol/μL和6 pmol/μL,最佳退火温度为55℃;该方法对3种病毒的最低检测限分别为1.46×105拷贝/μL、8.93×102拷贝/μL和2.11 ×104拷贝/μL;且该方法不能扩增出减蛋综合征病毒、马立克病毒、鸡传染性贫血病毒和H9亚型禽流感病毒等,临床样品检测结果与单项PCR结果相同.表明本研究建立的多重PCR检测方法具有较高的敏感性、特异性和稳定性,可有效地区分FAV-Ⅰ、NDV、IBV.
禽腺病毒Ⅰ群、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、多重PCR
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R511.8(传染病)
国家重点研发计划项目;山东省现代农业产业技术体系项目
2020-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
17-20
