猪MAVS基因原核表达载体的构建及其多克隆抗体的制备
通过RT-PCR从PK-15细胞系中扩增克隆MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,构建原核表达载体pET-MAVS220,转化感受态细胞Rosetta(DE3),利用IPTG诱导表达,重组MAVS经纯化后免疫4周龄昆明系小鼠制备抗线粒体抗病病毒信号蛋白(MAVS)多克隆抗体.诱导表达的最佳条件为IPTG 0.05 mmol/L,37℃诱导6h,重组MAVS以可溶性蛋白和包涵体两种形式表达.应用该重组蛋白免疫小鼠获得的抗MAVS多克隆抗体与纯化的重组MAVS蛋白反应效价可达1∶16000;该抗体与Poly (I∶C)刺激PK-15细胞产生的MAVS及与转染了重组MAVS基因真核表达载体pcDNA3.0-MA-VS的BHK-21细胞表达的MAVS蛋白发生特异性反应,效价可达1∶1 000,特异性良好.
猪MAVS、原核表达、多克隆抗体
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S858.28(动物医学（兽医学）)
广西自然科学基金重点项目2012GXNSFDA053009;国家自然科学基金项目31460653
2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
39-42
