10.3969/j.issn.0529-6005.2015.09.001
猪圆环病毒2型Cap蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
为了建立检测PCV-2抗体的间接ELISA方法,本研究以猪圆环病毒2型(PCV-2)重组Cap蛋白作为包被抗原,优化了反应条件及抗原、抗体工作浓度.结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/mL,待检血清的最佳稀释度为1:80;最佳封闭液和抗体稀释液为含1%明胶、0.05% Tween-20的0.01 mol/L pH值7.4 PBS;当被检血清的OD450nm值≥0.3时为阳性,当OD值<0.3时为阴性.该方法与猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬病、猪流行性腹泻等病毒抗体无交叉反应,与免疫过氧化物酶单层试验的符合率为98.3%,批内与批间重复性试验的变异系数分别低于5%与8%.应用建立的方法检测了126份2013年采集的猪血清,PCV-2抗体阳性率为40%~100%,表明河北省的猪群中PCV-2感染率很高.
PCV-2、重组Cap蛋白、间接ELISA、抗体、应用
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S852.65+1(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金项目31172329;河北省科技计划项目13226603D-1<2013-X>;河北省生猪产业技术体系疫病控制专项资金
2015-11-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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