禽波氏杆菌RAPD-PCR反应体系的建立与优化

摘要：

随机扩增多态性DNA (RAPD)作为一种分子标记技术,可用于多种病原菌的基因分型.为建立适合禽波氏杆菌RAPD分析的扩增体系,本试验以禽波氏杆菌基因组DNA为模板,对20条随机引物进行了筛选,并对RAPD-PCR反应体系中的重要参数设置梯度进行单因素试验分析,以确定最佳反应条件.经大量重复试验筛选到6条随机引物,确定25 μL的反应体系中模板DNA的量为50 ng,随机引物浓度为0.2 μmol/L,dNTPs的量为0.2 mmol/L,Mg2+浓度为1 mmol/L,Taq酶为1U.该优化体系对22株禽波氏杆菌均能扩增出清晰稳定且多态性好的DNA指纹图谱,为后续的禽波氏杆菌RAPD基因分型奠定了良好的基础.

关键词：禽波氏杆菌、RAPD、反应体系、优化

所属期刊栏目：49

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31272595,30972183,30740077

在线出版日期：2014-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：16-19