猪IL-18在酵母中表达及活性检测

摘要：

以pGEMT/pIL-18为模板,应用PCR法扩增出猪IL-18基因,用EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ双酶切后,插入酵母表达载体pPICZαA中,经酶切、PCR扩增及序列测定,成功构建了酵母重组表达载体pPICZ/pIL-18,电击转化毕赤酵母X-33,应用Zeocin筛选获得高拷贝重组转化菌株,甲醇诱导表达,经SDS-PAGE电泳分析重组pIL-18蛋白的表达,并用SephadexG200纯化表达的重组pIL-18蛋白.运用MTT法检测其生物学活性.试验结果表明,重组X-33酵母菌株能够表达分泌性pIL-18,诱导72 h表达量最高,其表达量占总蛋白表达量的38％.而且纯化的重组pIL-18蛋白具有明显促进淋巴细胞增殖的活性.

关键词：猪、白细胞介素18、毕赤酵母、生物活性

所属期刊栏目：49

分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省教育厅自然科学研究计划项目2011A230012

在线出版日期：2013-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35