实时荧光定量RT-PCR检测禽白血病病毒方法的建立与应用

摘要：

建立了Taq Man 实时荧光定量RT-PCR方法检测禽白血病病毒(ALV).选取ALV病毒的LTR序列设计引物和探针,以梯度稀释的含有ALV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.阳性标准品在3.0×102～3.0×107个拷贝共6个数量级的范围内,定量PCR反应有"S" 型扩增曲线,检测灵敏度最低为30个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对新城疫病毒、禽流感病毒、传染性支气管炎病毒、传染性囊病病毒、鸡传染性贫血病毒和马立克病病毒核酸都没有扩增反应.实时定量PCR检测ALV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义.

关键词：禽白血病、实时荧光定量RT-PCR、Taq Man探针

所属期刊栏目：46

分类号：S852.65+9.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东出入境检验检疫局科研课题SK200896

在线出版日期：2010-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3-6