含绿色荧光蛋白基因和猪瘟E2基因的伪狂犬病毒Bartha-K61株TK基因缺失转移载体的构建

摘要：

提取伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据Genbank已发表的PRV Kaplan株UL区UL25、UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,这两对引物分别扩增出位于UL23(TK)两侧(含部分TK基因)的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL25、全部UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失270个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得pSKLR;再将绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1上含GFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLKG;又将猪瘟病毒1.23 kb的E2(CSFV-E2)基因片段插入pSKLRG的多克隆位点的Bg1Ⅱ与PstⅠ之间获得转移载体pSKLRGE2.

关键词：伪狂犬病毒Bartha-K61株、TK基因、EGFP基因、猪瘟病毒E2基因、基因缺失、转移载体

所属期刊栏目：39

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3-8