RNAi沉默原代星形胶质细胞IL-17基因表达方法的建立

摘要：

目的 通过基因沉默技术构建质粒成功转染原代星形胶质细胞(Ast)抑制IL-17表达,探讨IL-17的功能.方法 在制备原代Ast基础上,应用IL-17基因沉默质粒pGenesil-1A和B,用Lipofectamine 2000转染Ast,通过荧光分析法、RT-PCR法、Western Blotting法观察IL-17基因沉默后效果.结果 携带pGenesil-1B和A的IL-17基因沉默质粒制备成功后,免疫荧光携带pGenesil-1B转染效果明显高于pGenesil-1A,其转染率可高达56.72％;基因沉默组在转染后72 h内任一时间点IL-17 mRNA表达均低于正常对照组和基因沉默对照组(P＜0.05),且24 h IL-17表达最低(P＜0.05).蛋白表达上,在IL-17基因沉默后3、5、7 d,其蛋白表达仍持续减低(P＜0.05).结论 应用Lipo-fectamine 2000可成功将IL-17 RNAi pGenesil-1质粒转染至原代星形胶质细胞.

关键词：原代星形胶质细胞、IL-17、基因沉默技术、转染

所属期刊栏目：27

分类号：R282.71;R587.2(中药学)

在线出版日期：2023-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1191-1195