基于试纸条核酸提取和重组聚合酶扩增技术的HPV 16型DNA纸基电化学发光快速检测方法

摘要：

目的 建立一种人乳头瘤病毒(HPV)高危16亚型快速、灵敏、特异的检测方法.方法 采用前期构建的试纸条法提取样本HPV DNA,并以其为模板,使用电化学发光试剂(酯化钌)标记上游引物,生物素标记下游引物,进行重组聚合酶恒温扩增,通过亲和素化的磁微球将生物素标记的扩增产物,在磁场的作用下富集,通过纸基电极-电化学发光检测技术,获得有酯化钌标记的待测物的浓度信息.结果 酯化钌与上游引物以20:1的摩尔比可以获得更高的标记效率和发光强度,该法最低检出限为50 copies/mL,比实时荧光PCR的灵敏度高16倍;批内检测相对标准偏差低于5％,单个样本从核酸提取到获得扩增结果所需时间小于1 h,具有较好的特异性、灵敏度和重复性.结论 该法检测快速、灵敏、特异、操作简单,具有一定的临床应用价值.

关键词：人乳头瘤病毒、纸基、核酸提取、重组聚合酶扩增、电化学发光

所属期刊栏目：27

分类号：R372;R373.9;R446.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：广州市科技计划项目;军队后勤科研项目;国家自然科学基金

在线出版日期：2023-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1009-1015