miR-4465靶向KPNA2调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

摘要：

目的 探讨微小RNA-4465(miR-4465)靶向核转运蛋白基因α2(KPNA2)调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测宫颈癌组织、癌旁组织中miR-4465、KPNA2的表达量;双荧光素酶报告检测miR-4465过表达对野生型和突变型KPNA2荧光素酶活性的影响;体外培养宫颈癌细胞Hela,利用脂质体法分别将miR-NC、miR-4465 mimics、si-NC、si-KPNA2、miR-4465与pcDNA、miR-4465 mimics与pcDNA-KPNA2转染至Hela细胞.甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;Western blot检测细胞周期蛋白1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量.结果 miR-4465在宫颈癌组织中的表达水平显著降低(P<0.05),KPNA2的表达量显著升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-4465能够抑制KPNA2-3′-UTR区荧光素酶活性;转染miR-4465 mimics或转染si-KPNA2后,与miR-NC或si-NC相比,细胞增殖活力显著降低(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著减少(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达量显著降低(P<0.05),p21表达量显著升高(P<0.05);与miR-4465+pcDNA组相比,miR-4465+pcDNA-KPNA2组细胞活力显著升高(P<0.05),迁移细胞数与侵袭细胞数显著增多(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达量显著升高(P<0.05),p21表达量显著降低(P<0.05).结论 miR-4465能够通过靶向KPNA2抑制宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭.

关键词：miR-4465、KPNA2、宫颈癌、增殖、迁移、侵袭

所属期刊栏目：25

分类号：R737.33(肿瘤学)

在线出版日期：2021-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：744-749