实时定量 PCR 检测 KIR 转录水平的方法构建

摘要：

目的：构建可定量检测杀伤细胞免疫球蛋白样受体（KIR）转录水平的方法。方法筛选 KIR3DS1和KIR3DL1保守区特异性引物，利用 RT-PCR 和熔解曲线法对引物特异性进行检验，建立可定量的标准内参，应用SYBR Green RT-PCR 方法检测标本中 KIR3DS1和 KIR3DL1的 mRNA 含量。结果通过电泳和实时定量 PCR 的熔解曲线明确了 KIR3DS1和 KIR3DL1引物，其特异性好，无杂带。应用 TA 克隆建立的 KIR 定量标准品线性关系好，可检测待测物的范围大。应用临床标本可检测出两组标本有显著差异，符合临床预期。结论本文建立的 KIR mRNA 定量检测方法，可以定量检测活化和抑制性 KIR，可以进一步研究不同疾病进展的机制以及预测疾病的临床转归。

关键词：KIR 基因、KIR3DS1、KIR3DL1、实时定量 PCR

分类号：R512.91(传染病)

资助基金：国家科技重大专项课题资助2008ZX10001-001

在线出版日期：2016-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2030-2033