CLIC4在饥饿诱导神经胶质瘤细胞自噬中的作用
目的：通过饥饿诱导人神经胶质瘤细胞发生自噬，利用 siRNA 技术部分沉默细胞内氯通道蛋白4（CLIC4），探讨 CLIC4在细胞自噬中的作用。方法根据 CLIC4的基因序列构建 CLIC4 siRNA 质粒，建立稳定转染CLIC4 siRNA 的 U251细胞株，分析 CLIC4蛋白表达；MTT 法检测转染 pSH1Si-CLIC4对细胞生存率的影响；利用Western Blot 检测转染 CLIC4 siRNA 在 U251细胞凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2表达；检测饥饿条件下 U251细胞 LC3蛋白、Bax、Bcl-2的表达；检测抑制 CLIC4表达对于饥饿条件下细胞白 caspase-3和胞浆 cytc 以及 LC3的表达。结果Western Blot 显示，与空质粒对照组相比，转染 CLIC4 siRNA 的 U251细胞 CLIC4表达显著下降；与对照组相比，转染空质粒细胞组以及瞬时转染 pSH1Si-CLIC4载体细胞组 U251细胞生存率均无明显差异；单纯 CLIC4 siRNA 对于U251细胞 Bax、Bcl-2表达无影响；与对照组相比，饥饿8 h 能够诱导 U251细胞自噬，LC3水平显著增加，而细胞 Bax、Bcl-2表达无明显变化；转染 CLIC4 siRNA 后饥饿8 h，caspase-3、cytc 以及 LC3表达增加。结论单纯 CLIC4 siRNA对于 U251细胞自噬和凋亡均无显著影响，饥饿条件下 U251细胞发生自噬的同时并没有明显细胞凋亡过程，抑制CLIC4表达促进了饥饿条件下的 U251细胞自噬，同时能够启动线粒体相关途径的细胞凋亡。
胶质瘤细胞、自噬、凋亡、CLIC4
R363.2(病理学)
吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目吉教科文合字2011第363号
2015-06-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
707-709,710
