大鼠血清的4种处理方法对2DE效果的影响

摘要：

目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2DE)分离效果的影响.方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;imagemaster5.0软件分析所得蛋白质斑点.结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865±39,平均匹配点数为532±39,543±51,623±42和746±52,匹配率为83.4%,86.2%,82.3%和85.5%,分析不同凝胶间蛋白质点在IEF方向的位置偏差为(0.87±0.31)mm,(0.79±0.23)mm,(0.82±0.33)mm和(0.85±0.30)mm,在SDSPAGE方向上的偏差为(0.84±0.42)mm,(0.81±0.39)mm,(0.99±0.16)mm和(0.97±0.12)mm.结论采用改良的TCA/丙酮沉淀法及采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒处理的大鼠血清样本进行双向凝胶电泳均能得到分辨率较高且重复性好的电泳图谱,且应用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒优于改良的TCA/丙酮沉淀法.

关键词：血清、蛋白质组学、双向凝胶电泳、高丰度蛋白

分类号：R446.1(诊断学)

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1544-1547