10.3969/j.issn.1007-4287.2012.06.002
脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达
目的 在大肠杆菌中表达脑钠肽前体(proBNP)及氨基末端前体蛋白(NT-proBNP).方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T- proBNP 和PGEX-20T-NT- proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白.结果 在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性.结论 两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂盒的开发奠定基础.
脑钠肽前体蛋白(proBNP protein)、氨基末端脑钠肽前体蛋白(NT-proBNP protein)
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Q785;Q786(基因工程(遗传工程))
深圳市福田区科技计划项目FTWS2009042;深圳市福田区科技计划项目FTWS201133
2012-07-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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