应用RNAi技术沉默survivin基因对肝癌细胞系BEL-7404生长的影响

摘要：

目的 为研究生存素survivin基因的功能及肝细胞癌(HCC)的基因治疗策略.构建针对survivin基因的siRNA的表达载体,转染肝癌细胞系BEL-7404后评价其对survivin 基因表达的抑制作用.方法 依据survivin基因设计siRNA片断,构建pGenesil-1/survivin表达载体,脂质体LipofectamineTM 2000转染BEL-7404细胞.实时定量聚合酶链反应从基因转录水平检测survivin基因的表达率,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞系BEL-7404中survivin蛋白表达抑制情况.结果 本实验已成功构建了针对survivin基因的pGenesil-1/survivin质粒.实时定量PCR检测显示,BEL-7404细胞经特异性siRNA作用后survivin基因的表达受抑制,其Ct值由34.2降低到22.8,免疫组织化学结果显示,pGenesil-1/survivin介导的siRNA能抑制BEL-7404细胞中survivin蛋白的表达.结论 构建的siRNA能特异地抑制survivin靶基因在肝癌细胞株BEL-7404中的表达,为肿瘤的生物学治疗提供了新的方法和材料.

关键词：RNA干扰、生存素、BEL-7404细胞、基因表达

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分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目30360116;广西科学研究与技术开发计划项目桂科攻0428005-7;广西壮族自治区教育厅面上项目200911MS163;广西壮族自治区卫生厅计划课题Z2009030

在线出版日期：2012-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1991-1994