流式微球分析技术检测人心肌钙蛋白T方法的建立

摘要：

目的 建立流式微球分析技术(cytoometric bead assay,CBA)检测人肌钙蛋白T(cTnT)方法.方法 用鼠抗人的cTnT的单克隆抗体包被在已激活的羧基化聚苯乙烯微球上,然后再用包被好的微球与检测标本进行抗原抗体免疫反应,并加入羊抗人cTnT的多克隆抗体和异硫氰酸荧光素(FITC)标记的驴抗羊的IgG,室温避光免疫反应一定时间后洗涤一次,上流式细胞仪检测FITC的荧光强度,以此测定标本中cTnT含量.结果 通过正交试验,在100 μl反应体系中,微球含量大约为1.25×106,选择10 μg的鼠抗人cTnT单克隆抗体为最佳加入量,加入标本和抗体后,选择避光反应时间为120 min,洗涤选择一次,选择8 μg/ml羊抗人cTnT多克隆抗体和20 μg/ml FITC标记驴抗羊IgG为最佳工作浓度;方法检测灵敏度为16.0 pg/mL,线性范围是16-5 000 pg/mL,批内重复性变异系数为5.2-11.3%,回收率是94.7-111.5%,高浓度的胆红素、胆固醇和甘油三脂无明显干扰,与Roche Elecsys的电化学发光法有较好的相关性.结论 自建CBA检测cTnT技术性能较好,可在临床工作中推广使用.

关键词：心肌钙蛋白T、流式微球分析技术、方法学

所属期刊栏目：15

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：贵州省科学技术基金黔科合J字[2007]2113号;贵州省科技计划课题黔科合S字[2007]1057号

在线出版日期：2011-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：659-661