10.3969/j.issn.1007-4287.2011.03.008
实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250mRNA的表达
目的 评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小干扰RNA(siRNA)表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术.方法 体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250mRNA的表达情况.结果 四条siRNA分别使G250mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%,阴性对照和空白对照组无明显变化.结论 实时荧光定量RT-PCR技术可以准确地检测mRNA的表达,可以用来评价siRNA的有效性.
siRNA、G250基因、肾细胞癌、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应
15
R737.11(肿瘤学)
2011-05-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
404-406