Mfn2基因克隆及pEGFPmfn2真核表达质粒的构建

摘要：

目的 利用基因工程技术克隆线粒体融合蛋白2(mitofusin-2,mfn2)基因并构建一种无细胞毒性、不激活原癌基因的真核表达的pEGFPmfn2质粒载体.方法 采用高效Trizol试剂快速提取大鼠血管平滑肌细胞株A7r5总RNA,经RT-PCR获得mfn2cDNA,扩增、纯化、回收mfn2基因片段并将质粒pEGFP-N1和mfn2基因片段分别双酶切,前者纯化回收大片段,后者纯化回收2.2 kb片段,再将回收的pEGFP-N1大片段与mfn2基因片段(2.2 kb)重组.对重组pEGFPmfn2质粒进行PCR和双酶切鉴定并测序.结果 成功地从A7r5中克隆了mfn2基因,并构建了以pEGFP-N1为载体的真核表达质粒.结论 含mfn2基因新型表达质粒构建的成功将为研究mfn2功能、进一步研究该基因异常表达与心血管疾病发生的关系奠定基础.

关键词：基因克隆、线粒体融合蛋白2基因、真核表达质粒载体

所属期刊栏目：14

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：宁夏自然科学基金资助项目NZ0898

在线出版日期：2010-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1689-1692