10.3969/j.issn.1007-4287.2010.04.006
氟对二维和三维培养皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响
目的 观察不同浓度氟化钠在不同时间对二维和三维培养皮肤成纤维细胞(FB)CTGF表达的影响,分析CTGF表达变化在氟化钠刺激FB成骨功能方面的作用.方法 将二维和三维培养FB分为对照组和6个染氟组(0.000 1、0.001、0.1、1、10和20 mg/L),在不同染氟时间点(2、4、24、48、72和96 h)采集培养细胞和培养液上清,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测FB培养液中CTGF蛋白含量,应用RT-PCR方法检测染氟48 h FB CTGF mRNA 表达;应用免疫组化法(IHC)检测染氟FB细胞CTGF的阳性表达.结果 ELISA结果可见,在二维培养体系中染氟FB CTGF蛋白表达量在染氟4 h的0.001、0.1 mg/L组和染氟72 h的20 mg/L组较对照组明显增高(1.50±0.40比1.02±0.03,P<0.01;1.42±0.20比1.02±0.03,P<0.05;1.59±0.40比0.93±0.06,P<0.01);在三维培养体系中,染氟48 h的20 mg/L组、72 h的10 mg/L组、96 h的0.001、10、20 mg/L组CTGF蛋白含量较对照组明显升高(1.45±0.17比1.21±0.05,P<0.05;1.43±0.22比1.17±0.09,P<0.05;1.39±0.04、1.52±0.08、1.45±0.03比1.17±0.17,P<0.01).染氟48 h 二维和三维培养FB在较高剂量染氟组CTGF mRNA的表达有增强,但均无统计学意义;免疫组化结果表明氟可刺激FB CTGF阳性蛋白的表达.结论 氟化钠可明显刺激二维和三维培养FB中CTGF的表达,这种表达增强可能在氟刺激FB成骨功能方面具有重要作用.
结缔组织生长因子、成纤维细胞、三维细胞培养
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R364.3(病理学)
国家自然科学基金资助项目30471498
2010-05-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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