10.3969/j.issn.1007-4287.2009.02.004
抗胎儿血红蛋白单克隆抗体的制备及特性鉴定
目的 制备和鉴定抗胎儿血红蛋白(fetal hemoglobin,HbF)单克隆抗体(mAb),为相关疾病的研究提供支持与工具.方法 用脐带血红细胞裂解物免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(NS-1)融合制备杂交瘤,经筛选和三次克隆化,从制备的腹水中纯化单克隆抗体.用ELISA以及western blot等方法鉴定单克隆抗体的特性(效价、Ig亚类、特异性以及亲和力).结果 筛选到3株可稳定分泌抗HbF单克隆抗体的杂交瘤细胞6A5、5C8、2C8,腹水效价分别为1×10-6、 2×10-6和4×10-6.单抗亚类均为IgG1,抗体亲和力分别为7.8×109、2.2×108和8.6×109.ELISA和western blot结果显示,6A5、5C8、2C8 mAb只与HbF的二聚体特异性结合,与其他类型血红蛋白不发生交叉反应.结论 获得3株能特异性识别HbF的高亲和力mAb,可结合二聚体与单体HbF,为临床检测HbF水平及相关研究提供了有效的工具.
胎儿血红蛋白、单克隆抗体
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R446.62(诊断学)
广东科技计划项目2007B031512001
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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