10.3969/j.issn.1007-4287.2009.02.002
细胞内氯通道4基因siRNA表达载体的构建及其沉默效应
目的 构建针对细胞内氯通道4(CLIC4)的短链干涉RNA(siRNA)及其表达载体,转染细胞后观察其对CLIC4基因的干涉作用.方法 设计CLIC4靶向的发夹状siRNA,据此设计合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接到pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定.用脂质体转染法转染大鼠神经胶质瘤细胞C6,通过RT-PCR检测CLIC4基因表达水平的变化.结果 酶切鉴定与DNA测序分析证明CLIC4基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CLIC4基因的表达水平明显降低.结论 成功地构建了针对CLIC4基因的siRNA载体,转染细胞后可显著抑制CLIC4基因表达.
短链干涉RNA、RNA干涉、细胞内氯通道4、神经胶质瘤
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Q813(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金项目资助30570687;吉林省科技厅基金资助项目200505139;吉林省教育厅"十一五"科学技术研究项目
2009-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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