RNA干涉与卵巢癌化疗药物敏感性的相关性研究

摘要：

目的 设计应用含有T7-启动子的Oligo-DNA合成发夹RNA,并应用T7-ShRNAs对卵巢癌SKOV3细胞株的C-erbB2基因进行RNAi,继而进行与卡铂相关的化疗敏感性研究.方法 自行设计并应用体外转录法合成并筛选出3条T7-ShRNAs,脂质体转染卵巢癌SKOV3细胞,分为非转染组、无关RNA组、shRNA(a,b,c)组,免疫细胞、RT-PCR观测干涉结果,应用CCK-8进行干涉与化疗敏感性的监测.结果 体外转录.结果 合成后电泳检测shRNA(a,b,c)纯度符合实验标准;转染后免疫细胞爬片结果及半定量的RT-PCR结果显示:非转染组、无关RNA组和shRNA c链24、48、72小时可见细胞生长正常,与时相无关,着色为深棕色,无抑制效果;shRNA a链24 h可见有一定抑制效果,但48小时即开始恢复生长,72小时已恢复正常;shRNA b链 24、48、72 h可见有明显抑制效果,以24-48小时最为明显,至72小时仍维持相当抑制率;CCK-8动态观测:经shRNA干涉后不同时间内的抑制曲线显示:shRNAb链的抑制作用明显,与卡铂联合应用效果明显抑制作用最强.结论 研究证实应用发夹RNA对肿瘤细胞可以取得明显干涉效果,发现shRNAb对C-erbB2基因干涉具有明显抑制作用,通过RNA干涉关闭基因后可明显增加卡铂敏感性.其机制尚需进一步探讨.

关键词：RNA干涉、卵巢癌、化疗敏感性

所属期刊栏目：12

分类号：R737.31(肿瘤学)

在线出版日期：2008-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：843-846