大鼠骨髓MSCs表面分子检测及诱导分化研究

摘要：

目的 通过建立大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离培养方法,探讨大鼠MSCs表型特征以及多向分化潜能.方法 利用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化Sd大鼠骨髓MSCs,传代扩增,进行形态学观察,测定生长曲线.免疫细胞组织化学及流式细胞分析检测细胞表面分子的表达.定向诱导MSCs向脂肪细胞、成骨细胞及软骨细胞分化.结果 原代分离的MSCs在接种后48 h贴壁,细胞形态为椭圆形,多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90％单层融合.经传代扩增,细胞进一步纯化,细胞形态为均一的长梭形并呈漩涡状排列,而且生长速率加快,P1代细胞群体倍增时间为20.3 h.细胞免疫组化结果显示P2代细胞表面分子CD44、FN表达阳性,而CD14、CD34阴性,流式细胞检测CD44、FN阳性率分别为92.09％和90.55％.不同诱导剂定向诱导2周,经油红0、阿新兰及茜素红S染色鉴定,P3代MSCs分别向脂肪细胞,软骨细胞及成骨细胞分化.结论 通过密度梯度离心结合贴壁筛选方法,体外分离培养的大鼠骨髓MSC8具有很强的增殖能力,并保持稳定的表型特征及多向分化潜能.

关键词：骨髓、间充质干细胞、细胞培养、鉴定、大鼠

所属期刊栏目：12

分类号：Q813(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2008-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：12-15