人PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的 构建人PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体并进行鉴定.方法 参照PTEN基因全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点.从正常人胎盘组织中提取mRNA作为模板合成第一链,并扩增目的基因序列片段,经双酶切后定向克隆至绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中,筛选阳性重组质粒,分别经双酶切、测序法对重组质粒进行鉴定.结果 双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2 kb;测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同.结论 成功构建了人PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1-PTEN,为研究在肿瘤发生发展中的作用奠定了基础.

关键词：PTEN、抑癌基因、真核表达载体、绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：11

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-01-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1448-1450