10.3969/j.issn.1007-4287.2007.11.005
下调PAI对HpG2细胞VEGF表达的影响
目的 探讨PAI的发卡样siRNA真核表达载体PAI siRNA对人肝癌HpG2细胞VEGF表达的影响.方法 设计短发夹状PAI siRNA的寡核苷酸链,将其插入到真核细胞表达载体pSilencerTM 2.1-U6 neo载体中,构建的重组载体后;采用脂质体转染方法将构建的重组载体导人人肝癌细胞HpG2中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、western blot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化以及对VEGF表达的影响.结果 经测序证明PAI siRNA序列正确;转染PAI siRNA载体后,HpG2细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降(P<0.01).转染后,细胞中PAI含量降低,V EGF的表达也减少.结论 测序结果表明发卡样的PAI siRNA真核表达载体构建成功,转染HpG2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达,PAI siRNA能有效阻断PAI的蛋白合成,同时抑制细胞中V EGF的表达.
纤溶酶原激活物抑制剂-1、小RNA、血管内皮生长因子、肝癌细胞系
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Q786;R735.7(基因工程(遗传工程))
吉林省科技厅科研项目200505152
2008-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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