10.3969/j.issn.1007-4287.2007.11.001
2 mol/L尿素溶血试验在UT-B基因敲除小鼠核型鉴定中的应用
目的 探讨2mol/L尿素溶血试验在UT-B基因敲除小鼠核型鉴定中的作用.方法 (1)按SP级动物饲养标准进行饲养和繁殖;以UT-B基因敲除纯合子(UT-B-/-)成年雄鼠与C57/bl雌鼠合笼,繁殖出UT-B基因敲除杂合型小鼠(UT-B+/-,F1代),F1代UT-B+/-雄、雌鼠交配获F2代小鼠.(2)取F2代小鼠剪尾提取基因组DNA进行核型鉴定筛选纯合子小鼠(UT-B-/-)和野生型小鼠(UT-B+/+);(3)应用2 mol/L尿素溶血试验和肾脏RT-PCR进行UT-B-/-(Jknull)表型鉴定.结果 (1)在SP级饲养和繁殖的条件下,已获得足够的UT-B-/-和UT-B+/+小鼠;(2)2 mol/L尿素溶血试验证明,UT-B+/+小鼠和UT-B+/-小鼠的红细胞加入到2mol/L尿素中立刻溶血,UT-B-/-小鼠的红细胞10 min内不溶显示溶血抵抗.结论 2 mol/L尿素溶血试验可准确地鉴定出UT-B-/-小鼠,与基因组DNA的PCR鉴定方法联合应用,可以使引进的UT-B-/-小鼠稳定繁殖、传代.
UT-B、基因敲除、小鼠、尿素、溶血试验
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Q785(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30670852
2008-01-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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