SYBR Green Ⅰ实时RT-PCR定量检测前列腺癌患者外周血DD3mRNA

摘要：

目的 建立一种新的方法定量检测前列腺癌(PC)患者外周血DD3mRNA方法扩增LNCaP细胞株阳性表达的DD3mRNA,并以其扩增产物为外标准,通过优选引物及优化PCR的各项参数,建立了SYBR Green实时RT-PCR定量检测PC患者外周血DD3 mRNA的方法,并以此方法检测了健康男性志愿者、良性前列腺炎(BPH)患者和PC患者外周血DD3 mRNA.结果 所建立的SYBR Green实时RT-PCR方法最少可检测到10拷贝的核酸,在每反应108-103copies/ml范围内,CT值与起始模板浓度具有良好的线性关系,相关系数为-0.992～-1;扩增后仅有的熔解曲线特异峰显示很好的特异性;不同标准点批间变异系数范围为6.1%-13.7%(n=5).结论 基于双链嵌合染料SYBR Green建立的RT-PCR定量检测DD3 mRNA方法具有敏感性高、线性检测范围广、特异性强、重复性较好的特点;PC患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达.

关键词：前列腺癌、外周血、DD3 mRNA、实时RT-PCR

所属期刊栏目：11

分类号：R737.25(肿瘤学)

资助基金：浙江省台州市科委科技计划项目051KY042

在线出版日期：2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1374-1377