核包膜蛋白gp210自身抗原基因的克隆、表达、纯化及其临床应用

摘要：

目的 研究核包膜蛋白gp210基因在大肠杆菌中的稳定表达、纯化和免疫学活性鉴定.方法 从人外周血单个核细胞中提取细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增gp210蛋白中含优势表位的基因片段.将该段基因克隆入PET30a表达载体并转化到大肠杆菌BL21中表达.融合蛋白经Ni-NAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过SDS-PAGE电泳及ELISA方法进行鉴定.结果 在原核表达载体中成功构建了PET30a-gp210重组体.重组体诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析可见在相对分子量大约69 kD处有gp210融合蛋白的高效表达,经纯化获得纯度达90%的表达蛋白.ELISA检测结果显示该重组蛋白具有较好的抗原性和特异性.结论 应用基因工程方法,获得了gp210重组蛋白,为检测抗gp210抗体提供了特异性抗原,也为临床将抗gp210抗体作为PBC的特异性诊断指标奠定了基础.

关键词：原发性胆汁性肝硬化、gp210、核包膜蛋白、基因表达、重组蛋白

所属期刊栏目：11

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-12-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1343-1346