腺病毒5型E1A基因转染前后乳腺癌细胞相关指标水平的变化

摘要：

目的 本研究旨在探讨E1A基因对乳腺癌细胞凋亡的影响,为乳腺癌E1A基因治疗的可行性提供理论和实验依据.方法 ①构建E1A基因真核表达质粒pEGFP-E1A:通过酶切反应获得E1A基因,琼脂糖凝胶回收后,连接入pEGFP-C1载体EcoRⅠ和BamH Ⅰ位点中.②E1A基因转染乳腺癌细胞系:脂质体介导将E1A基因转入乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞株,经筛选获得稳定表达E1A基因的转染试验组细胞.③RT-PCR检测E1A基因的mRNA表达、western-blot检测E1A蛋白表达.流式细胞仪观察细胞凋亡率、免疫组化法检测HER-2/neu基因的表达水平,对比各组间的差异.结果 与对照组、空载体组相比,转染E1A基因后,E1A RNA和蛋白表达明显增高.SK-BR-3肿瘤细胞HER2/neu的表达明显降低,凋亡率增高.结论 本实验成功构建并稳定表达了E1A基因质粒,明显抑制乳腺癌细胞的生长,说明E1A基因在乳腺癌基因治疗中有重要意义,为其临床应用提供了理论和实验依据.

关键词：E1A基因、乳腺癌、基因转染

所属期刊栏目：11

分类号：R737.9(肿瘤学)

在线出版日期：2007-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：860-863