人SLPI启动子调控下eGFP基因表达载体的构建与表达

摘要：

目的构建SLPI基因启动子驱动下EGFP表达载体并验证该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控活性.方法通过PCR方法从人外周血基因组中扩增SLPI启动子,经序列分析后,利用pcDNA3.1(+)和pEGFP构建SLPI启动子调控下EGFP表达载体,以脂质体介导转染入人宫颈上皮癌Hela、肺腺癌A549、SPC-A1和肝细胞癌HepG2细胞中,经G418稳定筛选后,在荧光显微镜下观察该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控EGFP表达的活性.结果克隆出的SLPI启动子序列与Genebank上SLPI基因上游5'末端转录调控区的序列完全一致,稳定转染的细胞株Hela、A549、SPC-A1和HepG2中,CMV启动子控制下的EGFP基因均有表达,发出绿色荧光;而SLPI启动子调控下的EGFP基因在Hela、A549和SPC-A1中有表达,发出绿色荧光,在HepG2中则未见荧光发出.结论 钓取的人SLPI启动子在非小细胞肺癌细胞中具有特异调控其下游基因表达的活性,为探索该启动子调控下的抗肺癌基因治疗提供实验基础.

关键词：肺癌、分泌型白细胞蛋白酶抑制剂基因、启动子、基因治疗、加强型绿色荧光蛋白

所属期刊栏目：10

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省发展计委项目吉发改高技联字[2004]987号

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：115-117