小儿常见感染菌16S-23S rRNA基因区间的分子生物学研究

摘要：

目的探讨聚合酶链反应(PCR)加限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)分析在细菌rDNA区间检测中的应用.方法以16S-23SrRNA基因区间为靶序列,设计引物,选择合适的内切酶,采用PCR法加RFLP法检测标准菌株及临床菌株的rDNA区间.结果26株不同的标准菌株经PCR扩增后,分别出现一条带,两条带,三条带及多条带的不同DNA图谱,敏感性试验可检出2.5CFU的细菌,与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应.其中14种菌经一步PCR扩增即可区分.另12种菌除肺炎克雷伯氏菌与坚韧肠球菌经HinfI或Alu I酶切后仍不能区分外,其余经其中一内切酶酶切后均能区分.32例血培养阳性标本均扩增出与相应标准菌株相一致的图谱.结论16S23S rRNA区间基因PCR扩增加RFLP技术检测细菌rDNA区间,具有特异、敏感、快速、准确的特点,为细菌感染的病原诊断提供新的科学依据.

关键词：16S-23S rRNA基因、细菌、聚合酶链反应、限制性内切酶片段长度多态性

所属期刊栏目：5

分类号：R372(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：浙江省自然科学基金 398426

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：165-168