特异核酸捕获RT-PCR技术建立及在HCV RNA检测中的应用

摘要：

目的解决RT-PCR检测HCV RNA方法的重复性较差问题,使其成为常规实验室检测方法.方法采用亲合素生物素系统将HCV特异的核酸片段包被在微孔板上,利用特异核酸捕获样本中的HCV RNA然后进行逆转录和PCR扩增,从而建立了特异核酸捕获RT-PCR检测HCV RNA方法,并与酶消化法和抽提法进行比较,评价其敏感性、特异性、重复性及抗污染能力.结果特异核酸捕获RT-PCR获得的电泳条带较为清晰,其特异性、敏感性与酶消化法、抽提法无显著差异,但重复性高于抽提法,抗污染能力显著高于酶消化法和抽提法.结论特异核酸捕获RT-PCR检测HCV RNA方法能有效去除非特异核酸和提高电泳条带清晰度,并具有极强的抗产物污染能力.因此,特异核酸捕获RT-PCR具有广泛推广应用的明景.

关键词：丙型肝炎病毒、聚合酶链反应、方法学

所属期刊栏目：4

分类号：R512.6+3(传染病)

资助基金：广东省卫生厅青年科学基金97031;广东省自然科学基金970079

在线出版日期：2005-10-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：7-9