乳腺癌细胞CD44+CD24-/low亚群化疗药物外排作用研究

摘要：

目的 研究乳腺癌细胞CD44+CD24-/low细胞亚群对化疗药物的外排作用.方法 培养多药耐药MCF-7/ADR细胞株,应用免疫磁珠法(MACS)分选CD44+CD24-/low亚群,流式细胞仪检测分选前后CD44+CD24-/low细胞比例,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测化疗药物敏感程度,激光共聚焦显微镜下观察胞内阿霉素蓄积,流式细胞仪检测P-糖蛋白(P-gp)表达水平.分析MACS分选CD44+CD24-/low亚群结果 ,分选前后CD44+CD24-/low细胞比例,CD44+CD24-/low亚群对化疗药物的敏感性,CD44+CD24-/low亚群胞内化疗药物蓄积,CD44+CD24-/low细胞亚群的P-gp表达水平.结果MACS分选前后分别计数细胞数量,被分选出来的CD44+CD24-/low细胞比例约为6％.MCF-7/ADR细胞中CD44+CD24-/low细胞比例为6.21％,与分选所得CD44+CD24-/low细胞比例相符.经流式细胞仪检测,分选所得CD44+CD24-/low亚群中CD44+CD24-/low细胞比例约为93.85％,达到进一步相关试验要求.CD44+CD24-/low亚群的半数杀伤浓度(IC50)为(17.37±0.46)mg/ml,MCF-7/ADR细胞的IC50为(15.84±0.66)mg/ml,比较差异具有统计学意义(P<0.05).激光共聚焦显微镜下观察发现,MCF-7/ADR细胞及分选所得CD44+CD24-/low亚群均具有较强的药物外排作用,阿霉素多集中于细胞核膜表面内侧,在细胞核中心阿霉素蓄积较少.MCF-7/ADR细胞较CD44+CD24-/low亚群胞内蓄积更高浓度阿霉素,荧光强度分别为(571.67±11.15)和(518.67±11.93),比较差异有统计学意义(P<0.05).CD44+CD24-/low细胞亚群P-gp表达荧光强度为(114906.70±2560.19),MCF-7/ADR细胞P-gp表达荧光强度为(101177.10±2171.86),比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 经MACS分选所得CD44+CD24-/low细胞亚群有更强的药物外排能力,高表达P-gp蛋白,可能是引起乳腺癌多药耐药的重要原因.

关键词：乳腺癌、肿瘤干细胞、多药耐药、免疫磁珠法、化疗药物、外排作用

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资助基金：滨州医学院科研计划与科研启动基金资助项目项目编号:BY2014KJ36

在线出版日期：2021-01-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：199-202