食管癌患者手术前后免疫相关差异表达基因的筛选

摘要：

目的 采用抑制消减杂交技术,分析食管癌手术前后免疫相关的基因表达差异,了解手术治疗对食管癌患者免疫功能的影响.方法 选5例食管肿瘤患者,在手术治疗前和结束时每例患者分别取10 ml外周静脉血,样本采集后马上进行外周血单个核细胞(PMBC)分离及提取RNA.分为2组,手术前组和手术后组.每组5个人的RNA混合后做cDNA合成.治疗后组和治疗前组进行正向比较,cDNA经两轮杂交与PCR扩增后T/A克隆构建文库,并对克隆进行PCR扩增,选取部分阳性克隆测序,与GenBank同源比较,分析其生物学意义.结果 用SSH法建立食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的cDNA文库,通过筛选,发现在食管癌手术后,含有与免疫相关的基因,如IL-2、化学趋化因子受体4等表达较前增强,提示食管癌手术改善患者的免疫功能.另外还发现肿瘤相关基因CHES1表达较前增强,另外还发现了3个未知序列.结论 成功通过SSH建立了食管癌手术前后免疫相关的差异表达基因的消减文库,核酸序列分析结果表明其中部分基因为与炎症相关的基因,部分基因与癌症形成相关,还发现了一些未知序列.

关键词：食管癌、抑制消减杂交技术

所属期刊栏目：4

分类号：R73;R39

在线出版日期：2010-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：44-46