纳米级siRNA与壳寡糖复合物体内外抗脉络膜新生血管作用研究

摘要：

目的 观察小于扰RNA与壳寡糖(siRNA与COS)纳米复合物体内外抗脉络膜新生血管的作用.方法 实验研究.对2011年9月至2012年6月以提取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养并传代.用激光粒度仪检测siRNA与COS纳米复合物的粒径与zeta电位.用琼脂糖凝胶电泳评价siRNA与COS质量比分别为1/1,1/5时所形成的siRNA复合物的情况.利用SRB方法评价COS分别为5μg/mL、25 μg/mL、50μg/mL时,对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制情况.以及50 nmol siRNA浓度条件下,siRNA/COS质量比为1/1、1/5时形成的复合物对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制作用.采用单因素方差分析方法进行组间比较.利用荧光素眼底血管造影方法观察不同质量比的siRNA与COS (1/1、1/5)减轻血管荧光素渗漏的情况.结果 激光粒度仪检测显示随着COS的量增加,siRNA与COS纳米复合物的粒径在93.9～459.8 nm范围内变化,zeta电位在-19.5～17.8 mV范围内变化.琼脂糖凝胶电泳显示当siRNA与COS质量比为1/5时,siRNA能够完全与壳寡糖结合.质量比为1/1时,只有部分siRNA与壳寡糖相结合.SRB结果显示,两种质量比所形成的复合物对HUVEC增殖的抑制作用均强于对照组,siRNA与COS质量比分别为1∶1,1∶5时,增殖率分别为(68.7±12.2)％,(58.8±10.1)％vs对照组100％,差异有统计学意义(F =12.321,P=0.008).COS 5μg/mL、25μ g/mL、50μg/mL三个剂量组均未显示出对HUVEC增殖的抑制作用(F =0.713,P=0.558).2周时,siRNA与COS组,激光斑处荧光渗漏较对照组明显减轻.结论 该研究表明siRNA与壳寡糖纳米复合物在抗脉络膜新生血管中可能起到积极的作用,且毒性较低.

关键词：小干扰RNA、人脐静脉内皮细胞、壳寡糖、脉络膜新生血管

所属期刊栏目：33

分类号：R774.1;R363;R543

资助基金：辽宁省科技厅科技项目2011225014

在线出版日期：2015-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：311-315