枸杞多糖对蓝光诱导损伤人视网膜色素上皮细胞凋亡及线粒体膜电位影响

摘要：

目的 利用蓝光诱导体外培养的人视网膜色素上皮细胞(human retinal pigment epithelial cell,hRPE cell)损伤建立年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD)的实验模型,观察不同浓度的枸杞多糖对hRPE细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,探讨枸杞多糖防治AMD的可行性.方法 通过蓝光诱导建立hRPE细胞光损伤模型,不同浓度的枸杞多糖进行干预.实验分组:A组为正常hRPE细胞,B组(hRPE+光照)为光照损伤组,C组(hRPE+光照+0.01 mg/ml枸杞多糖),D组(hRPE+光照+0.1 mg/ml枸杞多糖),E组(hRPE+光照+1 mg/ml枸杞多糖).倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,并检测光照后24h及48h各组细胞的凋亡数及线粒体膜电位.结果 (1)倒置像差显微镜下见正常hRPE细胞呈梭形或多边形,单层贴壁生长,细胞边界清楚.光照损伤组部分细胞体积缩小,变圆,细胞周围见透亮圈；细胞核缩小,出现核边聚,培养液中出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.枸杞多糖干预组少许细胞积缩小,变圆,折光性改变,培养液中未出现圆形悬浮细胞及细胞碎片.(2) Annexin V-FITC/PI凋亡检测显示A组凋亡细胞数量最少；B组凋亡细胞数量最多；C组、D组及E组凋亡细胞数量与B组细胞差异有统计学意义(P＜0.01)；E组凋亡细胞数量与A组差异无统计学意义(P＞0.05).(3)线粒体膜电位检测显示A组阳性细胞数量最多；B组阳性细胞数量最少；C组、D组及E组阳性细胞数量及线粒体膜电位与B组相比差异有统计学意义(P＜0.01)；E组与A组差异无统计学意义(P＞0.05),B、C、D组与A组比较P ＜0.05有统计学意义.结论 枸杞多糖能抑制蓝光诱导损伤的hRPE凋亡,增强hRPE细胞线粒体膜电位,对hRPE有很好的保护作用.

关键词：视网膜色素上皮细胞、枸杞多糖、蓝光损伤、凋亡、线粒体膜电位

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资助基金：山东省自然科学基金ZR2009CM135

在线出版日期：2013-05-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：489-493