优化第三代慢病毒载体稳定表达β-珠蛋白治疗β-地中海贫血的研究

摘要：

目的:优化第三代慢病毒载体HS4区实现β-珠蛋白稳定表达,为β-地中海贫血安全有效的细胞治疗提供研究依据.方法:优化第三代慢病毒表达载体HS4区构建lenti-HBB;转染小鼠红白血病细胞系MEL后,通过RT-PCR、Western-blot分析β-globin基因转录及翻译情况;进一步通过正常人脐带血及重型β-地中海贫血患者外周血CD34+细胞感染lenti-HBB,经克隆形成实验、细胞涂片实验及流式细胞术检测CD34+细胞是否发生红系分化;通过NSG小鼠体内实验验证lenti-HBB的安全性及有效性.结果:小鼠MEL细胞感染优化后的lenti-HBB后能稳定表达β-珠蛋白;正常人脐血及重度β-地中海贫血患者外周血CD34+细胞感染优化后的lenti-HBB后可分化为红细胞;人CD34+细胞感染优化后的lenti-HBB移植NSG小鼠3.5个月后表达 β-珠蛋白.结论:通过优化第三代慢病毒载体HS4区稳定表达CD34+细胞β-珠蛋白,对重型β-地中海贫血及其他β-珠蛋白异常疾病是安全有效的.

关键词：β-珠蛋白、慢病毒、β-地中海贫血、基因治疗

所属期刊栏目：30

分类号：R556.61(血液及淋巴系疾病)

资助基金：北京市科技计划Z161100000216136

在线出版日期：2022-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：844-850