莱菔硫烷诱导急性髓系白血病KG1a和KG1细胞G2/M期阻滞的作用和相关机制

摘要：

目的:研究莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对急性髓系白血病细胞G2/M期阻滞的作用和相关机制.方法:不同浓度的SFN作用KG1a和KG1细胞48 h后,流式细胞术检测细胞周期的变化,利用高通量转录组测序技术检测SFN对KG1a细胞周期相关基因表达情况的影响;采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测P53、P21、CDC2、CyclinB1的mRNA表达.采用Western blot检测P53、CDC2、P-CDC2和CyclinB1的蛋白表达.结果:经SFN作用48 h后,KG1a和KG1细胞的G2/M期细胞明显增多,当SFN浓度为8 μmol/L时,KG1a细胞在G2/M期从11.9％上升至54.0％,KG1细胞从18.5％上升至83.3％(P＜0.001).SFN作用KG1a细胞后,KEGG通路分析结果显示,差异表达基因显著富集P53信号通路.热图结果显示,P53和P21基因表达上调,CDC2基因表达下调.KG1a和KG1细胞经SFN作用后,p53和P21的mRNA水平均出现上调(P＜0.05或P＜0.01).随着SFN剂量的上升,CDC2的mRNA水平呈下调趋势,当SFN为8 μmol/L时,CDC2的mRNA表达水平显著低于对照组(P＜0.05).经SFN作用KG1a和KG1后,p53的蛋白水平出现上调,SFN 8和12 μmol/L浓度组均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组细胞经SFN作用后CDC2的蛋白水平均明显下降,且呈浓度依赖趋势(r=0.9482和r = 0.8977),SFN 8和12 μmol/L浓度组CDC2蛋白水平均明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),P-CDC2蛋白表达水平上调.Cy-clinB1 的蛋白和mRNA表达水平一致,变化不明显.结论:SFN可能通过激活P53信号通路,进一步抑制CDC2表达和CDC2/CyclinB1复合物的活性,诱导急性髓系白血病KG1a和KG1细胞阻滞在G2/M期.

关键词：莱菔硫烷;白血病细胞;细胞周期;G2/M期

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分类号：R733.71(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金项目;河南省科技厅科技攻关资助项目;河南省青年骨干教师资助项目;河南省高校科技创新团队支持计划项目;河南省自然科学基金杰出青年项目

在线出版日期：2021-09-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1050-1055