调控A20对NF-κB表达及Jurkat细胞的影响

摘要：

目的:探讨在急性T淋巴细胞白血病糖皮质激素耐药Jurkat细胞株中,调控A20对NF-κB表达以及Jurkat细胞生物学特性的影响.方法:CCRF CEM和Jurkat细胞中分别加入100、10、1、0.1、0.01和0.001μmol/L地塞米松(DEX),培养24、48和72 h,应用CCK-8检测细胞增殖抑制的变化.构建A20质粒,设计并合成A20-siRNA,分别通过脂质体转染Jurkat细胞,CCK-8检测不同浓度DEX处理组、不同浓度DEX联合A20质粒和A20-siRNA处理组的Jurkat细胞增殖率.应用RT-qPCR检测NF-κB的mRNA表达水平,Westernbolt检测蛋白表达水平,采用流式细胞术检测Jurkat细胞凋亡.结果:不同浓度地塞米松(DEX)对CCRF CEM细胞生长的抑制作用呈显著的时间依赖性(r=0.984,P＜0.05)和浓度依赖性(r=0.966,P＜ 0.05);CCRFCEM细胞在24 h时,IC50接近1μmol/L,Jurkat细胞在1μmol/L和10μmol/L开始出现较大差异.由于1μmol/L DEX处理的Jurkat细胞增殖率无明显变化,故选取1μμ mol/L DEX处理的Jurkat细胞为对照组.检测显示A20质粒转染联合不同浓度DEX处理组细胞增殖率较DEX组及A20-siRNA联合DEX组低(P＜0.05).A20质粒转染Jurkat细胞后,NF-κ B的mRNA及蛋白表达明显低于对照组(P＜0.05),细胞凋亡率较对照组明显增高(P＜0.05);A20-siRNA转染Jurkat细胞后,NF-κ B的mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组(P＜0.05),A20-siRNA组细胞的凋亡率与对照组无明显改变(P＞0.05).结论:Jurkat细胞对DEX耐药,A20过表达联合DEX可增加对DEX耐药细胞的敏感性,降低Jurkat细胞增殖率;下调Jurkat细胞中NF-κ B的表达水平,促进Jurkat细胞的凋亡.

关键词：A20、NF-κB、T淋巴细胞白血病、耐药、RNA干扰

所属期刊栏目：28

分类号：R733;R457.1(肿瘤学)

资助基金：贵州省高层次人才科研条件特助项目TZJF-2010-099

在线出版日期：2020-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1144-1151