10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2020.01.009
过表达干扰素调节因子IRF1重塑K562细胞的稳态特征
目的:考察干扰素调节因子IRF1对K562细胞稳态及分化的影响.方法:构建3种不同的过表达载体以筛选实现IRF1增强表达的最佳方式;通过细胞计数考察IRF1对细胞增殖的影响;通过凋亡标记分析IRF1对药物诱导凋亡的影响;通过分化标记分析IRF1对红系分化的影响;通过RT-qPCR初步探索IRF1的调控机制.结果:利用P2A-T2A方式构建的单一开放阅读框具有最明显的表达效果,是实现IRF1增强表达的最佳方式;细胞计数结果发现,IRF1对K562的增殖无明显影响;Annexin V和7-AAD联合标记发现,IRF1过表达显著抑制细胞的凋亡进程;流式结果显示,IRF1同样可进一步提升CD71+ CD235a+双阳细胞比例,RT-qPCR检测证实了IRF1过表达对CD235a的调控作用.结论:IRF1过表达改变了K562细胞的稳态特征,增强细胞的抗凋亡能力并促进了向下游分化的潜力,提示IRF1在红系系统发育中可能发挥重要的调控功能.
K562细胞、干扰素调节因子1、细胞增殖、凋亡、红系分化
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R329.28;R331.1(人体形态学)
国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;天津市自然科学基金重点项目;天津市自然科学基金重点项目;中国医学科学院血液病基因治疗研究重点实验室建设计划项目;中国医学科学院血液病基因治疗研究重点实验室建设计划项目;中国医学科学院血液病基因治疗研究重点实验室建设计划项目;创新工程项目;创新工程项目
2020-05-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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