10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.05.018
LNK基因沉默和过表达对THP-1细胞STAT3表达影响的研究
目的:探讨LNK基因沉默和过表达对人单核细胞白血病细胞(THP-1) STAT3基因表达的影响.方法:培养THP-1细胞;以慢病毒为载体介导SiRNA、LNK(SH2B3)稳定沉默及过表达LNK基因;转染72 h后于倒置荧光显微镜下观察细胞的GFP表达量;应用流式细胞术检测慢病毒感染效率;RT-PCR验证L,NK沉默及过表达效应,检测STAT3 mRNA表达量;Western blot检测LNK、STAT3蛋白水平.结果:慢病毒感染72 h THP-1细胞GFP表达量达85%以上,细胞感染效率在99%以上.LNK沉默组LNK及STA T3 mRNA表达量明显低于对照组,而LNK过表达组的LNK和STAT3 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05).LNK沉默组LNK、STAT3蛋白水平明显低于对照组,而在LNK过表达组明显高于对照组(P<0.05).结论:成功建立了LNK基因沉默及过表达的THP-1细胞株.沉默LNK基因导致STAT3表达下调;过表达LNK基因,使STAT3表达上调;此结果提示LNK可能参与了STAT3的调控.
THP-1、淋巴细胞特异性连接蛋白、信号转导、转录活化因子3
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R733.71(肿瘤学)
国家自然科学基金;省科技厅
2019-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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