雷帕霉素通过EZH2/Hedgehog信号通路诱导慢性髓系白血病细胞凋亡

摘要：

目的:探讨雷帕霉素诱导慢性髓系白血病(CML)细胞凋亡的机制.方法:对CML细胞K562用雷帕霉素10(A组)、15(B组)和20(C组)nmol/L分别处理24 h,对照组不加雷帕霉素.采用MTT法检测雷帕霉素对K562细胞增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法检测雷帕霉素对K562细胞凋亡的影响,RT-PCR检测雷帕霉素对K562细胞EZH2/Hedgehog信号通路基因表达水平,Western blot检测雷帕霉素对K562细胞凋亡及相关信号通路蛋白表达水平.结果:MTT法检测发现,不同浓度雷帕霉素对细胞增殖有明显抑制作用,其中C组的细胞存活率37.6％±3.4％,显著低于其它各组(P＜0.05).通过AnnexinV-FITC/PI双染法检测发现,C组细胞的凋亡率为93.1％±8.1％,显著高于其它各组(P＜0.05).Western blot检测发现,K562细胞在雷帕霉素作用后,C组的Caspase-3和BAX蛋白相对表达水平分别为0.36±0.04、0.39±0.06,显著高于其它各组(P＜0.05);BCL-2蛋白水平0.17±0.03,显著低于其它各组(P＜0.05).RT-PCR检测发现,K562细胞在雷帕霉素作用后,EZH2与Hedgehog基因mRNA水平明显下降(P＜0.05),而Ptchl基因mRNA水平明显上升(P＜0.05).Western blot检测发现,K562细胞在雷帕霉素作用后,其EZH2与Hedgehog蛋白表达水平下降,而Ptch1蛋白水平上升(P＜0.05).C组的EZH2与Hedgehog蛋白相对水平分别为0.21±0.03、0.16±0.05,显著低于其它各组(P＜0.05);Ptch1蛋白水平0.46±0.06,显著高于其它各组(P＜0.05).结论:雷帕霉素可抑制白血病细胞中EZH2蛋白表达,从而干扰Hedgehog信号通路的激活,并促进凋亡蛋白的表达,减少抗凋亡蛋白水平,最终诱导白血病细胞的凋亡.

关键词：雷帕霉素、EZH2/Hedgehog信号通路、慢性髓系白血病、K562细胞

所属期刊栏目：27

分类号：R733.72(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;陕西省科技统筹项目

在线出版日期：2019-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1402-1408