10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2019.03.002
急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34启动子的克隆及其核心区鉴定
目的:克隆急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34上游启动子序列并检测其活性、鉴定核心区域.方法:PCR扩增MLAA-34基因启动子区全长片段,将其连接至pGL3-Basic载体,克隆重组质粒;构建一系列MLAA-34基因启动子5'侧翼区截短质粒;将含MLAA-34启动子序列的重组质粒及其截短型质粒转染至U937、HEK293细胞,应用双荧光素酶报告基因检测各片段的启动子活性,确定启动子最小活性区域,并通过生物信息学方法分析转录因子结合位点.结果:构建了含有MLAA-34启动子序列的重组质粒及其截短型质粒;与空载体相比,其启动子活性明显增加(P<0,001).MLAA-34最小活性区域位于转录起始位点-402 bp至-200 bp之间,其中包含E2F1,MZF-1,SP1,USF2和STAT3等多个转录因子结合位点.结论:成功构建急性单核细胞白血病新抗原基因MLAA-34不同缺失片段的启动子荧光素酶报告基因重组质粒,鉴定出核心启动子区,其中含有多个潜在的转录因子结合序列.
急性单核细胞白血病、MLAA-34启动子、转录调控
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R733.71(肿瘤学)
国家自然科学基金8153000580
2019-07-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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