急性髓系白血病(AML)中hsa_circ_0000254的实验研究

摘要：

目的:通过克隆环状RNA hsa_circ 0000254,构建过表达载体并初步鉴定其表达水平,为进一步的功能研究奠定基础.方法:人工合成hsa_circ_0000254的524 bp序列,用pGH克隆载体合成基因,然后酶切目的片段,连接到慢病毒过表达载体pLCDH-ciR中,测序验证.筛选阳性克隆,分别以pLCDH-circ254(C254)、NC(pLCDH-ciR)转柒293T细胞,培养40 h后收集细胞进行PCR检测及产物测序验证.结果:pLCDH-circ254表达载体经测序验证,测序峰图正常,且无杂峰或叠带,序列对比吻合,表明hsa_circ_0000254成功插入环状RNA表达载体pLCDH-ciR,过表达载体构建成功,表达效率高达1万倍.结论:成功构建hsa_circ_ 0000254表达载体,可高效表达hsa_circ_0000254.

关键词：急性髓系白血病、环状RNA、hsa_circ_0000254、pLCDH-ciR载体、载体构建

所属期刊栏目：26

分类号：R733.71(肿瘤学)

资助基金：宁波市自然科学基金;浙江省医药卫生科技计划;浙江省自然科学基金;浙江省自然科学基金

在线出版日期：2018-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：647-652