以肝素和抗CD16抗体为基础的扩增人脐血NK细胞无血清培养体系的建立

摘要：

目的:建立一种新方法以用于体外培养扩增人脐血来源的NK细胞,从而为NK细胞的治疗奠定基础.方法:收集人脐血单个核细胞,将细胞按1.5×106/ml悬浮于含5％自体血浆、重组人IL-15 (50 ng/ml)和氢化考的松琥珀酸钠(5×10-8 mol/L)组成的无血清培养液中,接种于含肝素钠或/和重组抗人CD16单克隆抗体铺板(预先铺板)的培养瓶中,其剂量分别为100 U/cm2和1 μg/cm2底面积.培养2周后收集细胞,计细胞总数,应用流式细胞术检测细胞中CD3-/CD56+比例.以K562细胞为靶细胞,应用MTT实验观察不同效靶比条件下的NK的细胞毒作用.结果:与未铺板培养体系比较,抗CD16抗体及肝素钠铺板体系培养的细胞,在培养1周内易见贴壁的集落.培养2周后,预先铺板组细胞扩增倍数明显高于未铺板组,且CD3-/CD56+比例显著升高,尤以抗体和肝素混合铺板组为显著(P＜0.01).MTT实验显示,预先铺板培养组所获得细胞对K562细胞的杀伤活性更强.结论:利用肝素和抗CD16抗体铺板,在培养体系中加入IL-15和氢化考的松,可使NK细胞优势扩增,从而获得纯度较高、细胞毒活性较强的NK细胞.

关键词：肝素、NK细胞、抗CD16抗体、无血清培养液

所属期刊栏目：26

分类号：R392.12

在线出版日期：2018-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：552-556