组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他抗小鼠骨髓瘤效应的实验研究

摘要：

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对小鼠骨髓瘤细胞SP2/0增殖的影响并探讨其作用机制.方法:用不同浓度SAHA处理SP2/0细胞24及48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡的变化;Westem blot法检测不同浓度SAHA处理SP2/0细胞48 h后Caspase-3和p53蛋白表达水平变化.分别以尾静脉途径和皮下途径注射SP2/0细胞,建立非侵袭性和侵袭性荷瘤模型.建模后d3开始,治疗组经腹腔注射SAHA,剂量为60 mg/(kg·d)(每周5次,连续3周),对照组腹腔注射SAHA溶剂.通过外周血涂片观察有无骨髓瘤细胞存在;每2d观察皮下荷瘤小鼠局部肿瘤体积变化;计算抑瘤率,记录小鼠生存期.结果:不同浓度的SAHA处理SP2/0细胞24或48 h后的结果显示,SAHA对SP2/0细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性关系(r24h =0.959;r48h =0.985).在SAHA体外作用下,SP2/0细胞周期分布结果显示G2期细胞比例明显升高,S期细胞比例明显降低.浓度分别为0.8、1.2、1.6、2.0、2.4 μmol/L的SAHA作用48 h后,SP2/0细胞早期凋亡率分别为8.14％±0.50％、21.08％±0.94％、27.30％±0.63％、55.58％±0.65％、72.22％±0.88％.Western blot检测显示,SP2/0细胞Caspase-3、p53蛋白表达水平随SAHA浓度增加而升高(rCaspase-3=0.968;rp53=0.984).经尾静脉注射SP2/0细胞(1x106)的荷瘤方式,仅诱导出非侵袭性荷瘤小鼠模型;而同样数量的SP2/0细胞皮下注射则诱导出了侵袭性荷瘤小鼠模型.与对照组相比,SAHA治疗后,非侵袭性荷瘤小鼠外周血循环中的骨髓瘤细胞消失,侵袭性荷瘤小鼠瘤体生长速度缓慢,小鼠生存期延长.结论:SAHA显著抑制了小鼠骨髓瘤细胞增殖,其抑制效应与诱导骨髓瘤细胞周期阻滞及凋亡相关联,而其机制与SAHA能够上调Caspase-3和p53蛋白表达水平有关.

关键词：多发性骨髓瘤、伏立诺他、动物模型、细胞凋亡、细胞周期

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分类号：R733.3;R979.1(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;河南省科技攻关计划省部共建项目;河南省科技厅基础与前沿项目

在线出版日期：2018-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：470-476