癌蛋白NPM-ALK关键磷酸化位点对细胞周期的影响及其机制研究

摘要：

目的:探讨NPM-ALK蛋白关键磷酸化位点Tyr644和Tyr664对细胞周期的影响及相关的分子机制.方法:建立NPM-ALK和NPM-ALK644,664稳定表达的Jurkat细胞以及瞬时转染的293T细胞,检测各个细胞系的周期分布;应用软琼脂集落形成实验检验野生型NPM-ALK与双点突变型NPM-ALK致瘤能力的差异;利用蛋白质印迹法检测NPM-ALK关键磷酸化位点对下游相关蛋白表达、修饰的调控作用.结果:野生和突变NPM-ALK在瞬时转染的293T细胞和稳定转染的Jurkat细胞中成功表达,转入双点突变型NPM-ALK的Jurkat细胞与转入野生型NPM-ALK的细胞相比呈现出明显的细胞S期阻滞;酪氨酸激酶抑制剂PPP对野生型NPM-ALK转染的Jurkat细胞杀伤效果最强,对双点突变型NPM-ALK转染的细胞的杀伤作用与阴性对照无明显差异;随着NPM-ALK的转入,下游与细胞生长相关分子STAT3、AKT和ERK的磷酸化水平有所升高(P＜0.05),双点突变型NPM-ALK转入后,相关蛋白的磷酸化水平与野生型相比显著降低(P＜0.05).结论:癌蛋白NPM-ALK的Tyr644和Tyr664两个关键磷酸化位点的突变会引起细胞S期阻滞和对药物PPP敏感性的降低,其机制可能与NPM-ALK下游的细胞生长相关分子的磷酸化表达变化相关.

关键词：癌蛋白NPM-ALK、磷酸化位点、细胞周期、双点突变

所属期刊栏目：24

分类号：R730.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;上海市科委国际学术合作交流项目;中央高校基本科研业务费专项;美国国家癌症研究所项目

在线出版日期：2016-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1201-1205