10.7534/j.issn.1009-2137.2016.04.039
蛋白磷酸酶2A催化亚基β(PPP2Cβ)过表达慢病毒载体系统的构建及对K562红系分化的影响
目的:构建蛋白磷酸酶2A的催化亚基PPP2Cβ慢病毒表达载体,获得较高滴度慢病毒颗粒,感染K562细胞建立稳定株,检测过表达PPP2Cβ对K562红系分化的影响.方法:将PPP2Cβ的CDS序列插入到第二代慢病毒表达载体FUGW,并与包装质粒pMD2G和psPAX2共转染293T细胞,36、48h分两次收集慢病毒上清,应用流式细胞术检测病毒滴度.获得的病毒感染K562细胞,应用Western blot检测过表达效果.采用联苯胺染色以及实时定量PCR检测过表达PPP2Cβ对K562红系分化的影响.结果:成功构建了PPP2Cβ慢病毒表达载体,利用慢病毒系统包装PPP2Cβ的慢病毒,获得了高滴度的慢病毒颗粒,并成功建立了PPP2Cβ的K562细胞稳定株,促进了K562向红系分化.结论:过表达PPP2Cβ能使K562细胞自发的向红系分化.
PPP2Cβ、慢病毒载体、红系分化、K562细胞
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Q789;R331.2;R331.141(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金;国家重点基础研究发展计划(973计划)
2016-10-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1173-1178